中国神经免疫学和神经病学杂志

2016, v.23(03) 172-176

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口服法舒地尔治疗EAE对巨噬细胞、T细胞及TLR/NF-B通路的作用研究
Research on macrophages,T cells and TLR/NF-kB pathway in EAE mice treated with oral fasudil

于婧文;张辉;宋国斌;李自青;尉杰忠;刘春云;张海飞;刘建春;王青;肖保国;李艳花;马存根;

摘要(Abstract):

目的探讨口服盐酸法舒地尔(Fasudil)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)小鼠巨噬细胞及TLR/NF-B通路的作用。方法采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽(myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55peptide,MOG35-55)诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,将EAE小鼠随机分为EAE模型组和Fasudil治疗组,免疫后第3天给予Fasudil治疗组小鼠Fasudil灌胃干预,直到免疫后第27天,EAE模型组同样处理给予等量生理盐水。光镜观察脊髓组织CD4+T细胞/CD68巨噬细胞表达的变化,Western blot法测定脊髓诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、精氨酸酶1(Arg-1)、Toll样受体2(TLR-2)、TLR-4和磷酸化核因子B(p-NF-B)蛋白的表达,ELISA法测定培养72h脾细胞分泌细胞因子的含量。结果与EAE模型组比较,Fasudil组CD4+T细胞数和CD68巨噬细胞数明显减少(P<0.01),巨噬细胞M1表型iNOS表达减少(P<0.05),M2表型Arg-1表达增加(P<0.01),炎性通路蛋白p-NF-B、TLR-2和TLR-4表达减少(P<0.05),外周细胞炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)和IL-17分泌减少(P<0.05),而IL-10分泌增加(P<0.05)。结论口服Fasudil可抑制CD4+T细胞/CD68巨噬细胞的激活,促进巨噬细胞表型M1向M2转化,抑制脊髓组织中p-NF-B、TLR-2和TLR-4的表达,抑制外周免疫细胞炎性因子分泌,而增加IL-10的分泌。

关键词(KeyWords): 脑脊髓炎,自身免疫性,实验性;巨噬细胞;TLR/NF-B通路;神经通路

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金2012年面上项目(81272163);; 山西中医学院“2011”培育计划项目(2011PY-1);; 山西省国际科技合作项目(2013081058);; 山西省回国留学人员重点科研资助项目(2014-重点7);; 大同大学校科研项目(2015Q15)

作者(Author): 于婧文;张辉;宋国斌;李自青;尉杰忠;刘春云;张海飞;刘建春;王青;肖保国;李艳花;马存根;

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