中国神经免疫学和神经病学杂志

2020, v.27(04) 312-316

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EC-SOD基因修饰BMSCs移植治疗脑梗死大鼠的实验研究
Experimental study of EC-SOD gene modified BMSCs transplantation therapy for cerebral infarction in rats

陈鸿尤;夏鹰;曹作为;陈达建;

摘要(Abstract):

目的探究胞外超氧化物歧化酶(EC-SOD)基因修饰后的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗对脑梗死大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法体外分离培养大鼠BMSCs,将在293T细胞中培养的含EC-SOD序列的载体转染至BMSCs细胞,免疫印迹法检测细胞中EC-SOD蛋白表达验证EC-SOD转染情况。Zea-longa线栓法建立脑梗死大鼠模型,建模成功后分为模型组(注射150 mmol/L PBS缓冲液10μL)、BMSCs组(注射BMSCs细胞悬液,细胞密度为1×10~5个/μL×10μL)、MSCs+EC-SOD组(注射转染EC-SOD表达载体的BMSCs细胞悬液1×10~5个/μL×10μL),对照组(不造模,仅结扎颈外远端动脉对照处理;注射150 mmol/L PBS缓冲液10μL),每组15只大鼠。以神经功能缺损(mNSSS)评分评定大鼠神经功能缺损情况,TTC染色法检测脑梗死面积,免疫荧光法检测脑组织中EC-SOD表达情况,Tunel染色检测脑组织细胞凋亡情况,免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率升高,Caspase-3、Bax蛋白表达升高,EC-SOD表达阳性率、Bcl-2蛋白表达降低(均P<0.05);与模型组相比,BMSCs组、BMSCs+EC-SOD组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率降低,Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2蛋白表达升高,BMSCs+EC-SOD组大鼠EC-SOD表达阳性率升高(均P<0.05);与BMSCs组相比,BMSCs+EC-SOD组大鼠mNSSS评分、脑梗死面积、脑组织细胞凋亡率降低,Caspase-3、Bax蛋白表达降低,EC-SOD表达阳性率、Bcl-2蛋白表达升高(均P<0.05)。结论 EC-SOD基因修饰BMSCs可降低脑梗死大鼠脑梗死面积及脑组织细胞凋亡率,对神经功能损伤具有一定的改善作用。

关键词(KeyWords): 脑梗死;骨髓间充质干细胞;移植治疗;胞外超氧化物歧化酶;细胞凋亡

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金项目(81360190)

作者(Author): 陈鸿尤;夏鹰;曹作为;陈达建;

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