中国神经免疫学和神经病学杂志

2017, v.24(02) 99-104

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法舒地尔对EAE小鼠血-脑屏障功能的保护作用及机制研究
Research about protective effects of fasudil on BBB function in EAE mice and study of the mechanisms

谷青芳;张辉;李艳花;刘春云;王慧卿;肖保国;尉杰忠;马存根;

摘要(Abstract):

目的探讨法舒地尔(Fasudil)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的血-脑屏障(BBB)保护机制。方法采用MOG_(35-55)肽段诱导C57BL/6小鼠建立EAE模型,于免疫后第3天起Fasudil组腹腔注射Fasudil[40mg/(kg·d)]干预,EAE组注射等量生理盐水,持续至免疫后第20天。于免疫后第7d、14d、21d采集小鼠脑和脊髓标本,行HE染色、脱髓鞘染色和免疫荧光染色;测定脑和脊髓伊文思蓝(EB)的渗透量;采用Western blot法检测脑内细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达情况。结果与EAE组相比,Fasudil组小鼠中枢神经系统(CNS)炎性细胞计数和髓鞘脱失面积均明显减少[分别98.00±33.15 vs.417.70±78.89,t=3.736,P<0.05;(11.38±1.09)%vs.(38.21±7.94)%,t=3.473,P<0.05]。在免疫后14d、21d,Fasudil组脑和脊髓内EB渗透量均低于EAE组(脑:9.04±0.15 vs.9.93±0.25,t=5.776,P<0.05;9.09±0.089 vs.9.83±0.22,t=3.116,P<0.05;脊髓:17.28±0.38 vs.21.33±2.21,t=7.782,P<0.05;16.48±0.71 vs.21.77±0.17,t=7.256,P<0.01)。与EAE组相比,Fasudil组小鼠脑内细胞紧密连接蛋白Occludin表达上调(7d:0.068±0.045 vs.0.127±0.022,t=6.026,P<0.05),14d:0.185±0.011 vs.0.233±0.014,t=2.609,P<0.05,21d:0.248±0.021 vs.0.364±0.121,t=2.834,P<0.01)和ZO-1(7d:2.013±0.073 vs.2.404±0.256,t=1.467,P>0.05;14d:1.783±0.129 vs.2.003±0.184,t=2.409,P<0.05;21d:1.332±0.052 vs.1.674±0.023,t=6.026,P<0.01)。结论 Fasudil可能通过抑制小鼠脑内细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的下调而保护BBB的完整性。

关键词(KeyWords): 法舒地尔;实验性自身免疫性脑脊髓炎;紧密连接;血-脑屏障

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金2012面上项目(81272163);; 山西中医学院“2011”培育计划(2011PY-1);; 山西省国际科技合作项目(2013081058);; 山西省回国留学人员重点科研资助项目(2014-重点7);; 大同大学校科研项目(2016K10)

作者(Author): 谷青芳;张辉;李艳花;刘春云;王慧卿;肖保国;尉杰忠;马存根;

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