HCV刺激小鼠小胶质细胞后TLR9 mRNA的表达Expression of TLR9 mRNA in BV2 cells after HCV stimulation
王振海;李晓梅;胡坤;
摘要(Abstract)：
目的检测丙型肝炎病毒(HCV)刺激小鼠小胶质细胞(BV2)后Toll样受体9(TLR9)的表达,探讨TLR9参与小胶质细胞抗HCV的免疫发病机制。方法将BV2细胞分为HCV阳性血清组(以含20% HCV阳性血清的DMEM培养),健康人血清组(以含20%健康人血清的DMEM培养),空白对照组(以含10%胎牛血清的DMEM培养),分别在培养4、12、20、36h收集细胞,以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法观察TLR9 mRNA表达。结果 BV2细胞有TLR9 mRNA表达。HCV阳性血清组中TLR9 mRNA于4、12、20、36h各时间点相对表达量分别为3.50±0.33、2.03±0.10、2.05±0.12、2.02±0.14,均高于健康人血清对照组(分别为0.99±0.08、1.01±0.09、1.00±0.10、0.99±0.09)和空白对照组(均为1)(P<0.01),且以HCV阳性血清刺激4h后TLR9 mRNA表达量最高(P<0.01)。结论 BV2细胞能够表达TLR9 mRNA,且BV2经HCV刺激后TLR9 mRNA表达明显增加,提示TLR9可能参与BV2抗HCV的免疫发病机制。
关键词(KeyWords)： 小胶质细胞;肝炎病毒属;Toll样受体9;实时荧光定量PCR
基金项目(Foundation): 2011年国家自然科学基金面上项目(编号:81160151);; 宁夏医科大学“博士学位建设学科”开放课题(编号:KF2010-34)
作者(Author): 王振海;李晓梅;胡坤;
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DOI:
参考文献(References)：
- [1]王振海,谢鹏,孔繁元.丙型肝炎病毒对中枢神经系统损伤的研究进展[J].国际神经病学神经外科学杂志,2006,33(1):75-78.
- [2]Wilkinson J,Radkowski M,Laskus T,et al.Hepatitis C vi-rus neuroinvasion:identification of infected cells[J].J Virol,2009,83(3):1312-1319.
- [3]Lin YC,Uang HW,Lin RJ,et al.Neuroprotective effects ofglyceryl nonivamide against microglia-like cells and 6-hydroxydopamine-induced neurotoxicity in SH-SY5Yhumandopaminergic neuroblastoma cells[J].J Pharmacol Exp Ther,2007,323:877-887.
- [4]Olson JK,Miller SD.Microglia initiate central nervous sys-tem innate and adaptive immune responses through multipleTLRs[J].J Immunol,2004,173(6):3916-3924.
- [5]Ribes S,Ebert S,Regen T,et al.Toll-like receptor stimula-tion enhances phagocytosis and intracellular killing of nonen-capsulated and encapsulated streptococcus pneumoniae by mu-rine microglia[J].Infect Immun,2010,78(2):865-871.
- [6]Krieg AM.A Tole for toll in autoimmunity[J].Nat Immu-nol,2002,3(5):4 23-425.
- [7]Iliev AI,Stringaris AK,Nau R,et al.Neuronal injury media-ted via stimulation of microglial toll-like receptor-9(TLR9)[J].FASEB J,2004,18(2):412-415.
- [8]Dalpke AH,Schfer MK,Frey M,et al.ImmunostimulatoryCpG-DNA activates murine microglia[J].J Immunol,2002,168(10):4854-4863.
- [9]Krieg AM.Antiinfective applications of toll-like receptor 9agonists[J].Proc Am Thorac Soc,2007,4:289-294.
- [10]胡坤,王国玮,姚红霞,等.HCV刺激小胶质细胞后不同时间点TLR9的表达水平[J].中国神经免疫学和神经病学杂志,2011,18(4):280-283.